Wie liesse sich zeigen, ob das Sexhormon-bindende Globulin zur α-, β- oder γ-Globulinfraktion desPlasmas gehört?

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Eine Plasmaprobe wird mit radioaktivem Testosteron inkubiert, elektrophoretisch aufgetrennt und gefärbt (s. Exp. Elektrophorese von Serumproteinen in Agarose-Gel). Die Globulinbanden werden auf Radioaktivität geprüft, indem z.B. die einzelnen Banden ausgeschnitten werden und die Radioaktivität in Szintillationsflüssigkeit bestimmt wird (s. Exp. Acylierung von Chymotrypsinogen mit p-Nitrophenyl-[3H]acetat).


Die normale Testosteronkonzentration im Plasma liegt bei etwa 6 µg/Liter (Bereich 3-10 µg/liter), wovon nur 2 % in freier Form vorliegen. Der Rest ist etwa zu gleichen Teilen an das Sexhormon-bindende Globulin (SHBG) und an Albumin gebunden. Die Dissoziationskonstante ( Kd) des SHBG für Testosteron (T) beträgt ~2 x 10-9 M. Das Kd von Albumin für T ist 1000 mal grösser als das Kd von SHBG. Die molekulare Masse von Testosteron beträgt 288.4 Da. Mit diesen Angaben lässt sich der Sättigungsgrad des SHBG und von Albumin mit Testosteron berechnen. Wie gross ist er für jedes der beiden Proteine?

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Kd = [ SHBG ] x [ T ] / [ SHBG•T ]

[Testosteron] = 2% von 6 µg/l = ca. 4 x 10-10 M

[ SHBG ] / [ SHBG•T ] = Kd / [ T ] = 2 x 10-9 M / 4 x 10-10 M = 5

Es ist also [ SHBG ] = 5 x [ SHBG•T ]

Sättigungsgrad = [ SHBG•T ] / [ Total SHBG ]

                  = [ SHBG•T ] / ([ SHBG•T ] + 5 x [ SHBG•T ] )

                  = 1 / (1 + 5) = 1/6 = 17%

Für Albumin ist Kd / [ T ] = 5000 und die Sättigung = 1 / 5001 = 0.02%