Wäre auf der verwendeten Säule von Sephadex-G-50 das Elutionsvolumen von Aldolase (160'000 Da) kleiner als dasjenige von Hämoglobin? -> Antwort Nein, die beiden Proteine besitzen das gleiche Elutionsvolumen, da in beiden Fällen die Molekularmasse grösser als die Ausschluss-Molekularmasse von 25'000 Da des Säulenmaterials (Sephadex G-50) ist. Mit welchem Elutionsvolumen würde Cytochrom c (13'000 Da) von dieser Säule eluieren? -> Antwort Unter Zuhilfenahme der Eichkurve für Sephadex G-50 aus Seite 31 des Kursheftes lässt sich das Elutionsvolumen für Cytochrom c auf 22-23 ml abschätzen. Im Diagramm kann man Ve/V0 für Cytochrom c ablesen (1.5) V0 entspricht dem Elutionsvolumen von Hämoglobin (15 ml; ergibt sich aus dem Kursexperiment 5.2) Ve = 1.5 * V0 = 1.5 * 15 = 22.5 ml   Wieso hat sich das Hämoglobin nach Zugabe von Trichloressigsäure braun verfärbt? -> Antwort Die Braunfärbung zeigt die Oxidation des denaturierten Hämoglobins zu Methämoglobin an. Im nativen Hämoglobin ist das leicht oxidierbare Häm in der apolaren Hämtasche vor der Oxidation geschützt. Mit der Denaturierung entfällt dieser Schutz.