Prinzip der Gelfiltration

Für eine Gelfiltrationssäule (Ausschluss-Molekularmasse > 32'000) gilt näherungsweise, dass V0 = 1/3 * Vt (abhängig vom Säulenmaterial) und dass das Volumen des Säulenmaterials (Vg) vernachlässigbar klein ist im Vergleich zu Vt . Schätzen Sie die Elutionsvolumina (Ve) folgender Substanzen für eine Säule mit Vt = 45 ml ab:

 

Elutionsvolumen Ve [ml]

Hämoglobin (64 kDa)

Alanin (68 Da)

Aldolase (160 kDa)

     richtige Antwort

Prinzip Gelfiltration

Welche der folgenden Aussagen ist richtig?

 

Richtig

Falsch

Der Verteilungskoeffiziend Kd einer Substanz gibt den Bruchteil des Volumens ausserhalb der Gelpartikel an, der für die Substanz zugänglich ist

Substanzen mit kleiner Molekularmasse haben ein grösseres Elutionsvolumen als solche mit einer grossen Molekularmasse

Die Auftrennung von Molekülen mit Massen oberhalb der Ausschluss-Molekularmasse ist etwa halb so gut wie im optimalen Bereich

Das Verhältnis des Elutionsvolumens zum Volumen ausserhalb der Gelpartikel (Ve / V0) ist über einen gewissen Bereich umgekehrt proportional zum Logarithmus der Molekularmasse einer Substanz

Das Elutionsvolumen einer Substanz hängt von der Molekularmasse der Substanz ab, aber nicht von ihrer Form

      richtige Antwort

Gelfiltration Animation

Gelfiltration - oder Gelchromatographie - führt wie andere chromatographische Methoden zu einer Auftrennung von Molekülen. Betrachten Sie zuerst das Prinzip einer chromatografischen Trennung. Was ist im Falle der Gelfiltration das differenzierende Kriterium?