Frage aus dem Kursheft

Wie könnte gezeigt werden, dass die Acetylgruppe kovalent an Ser 195 gebunden ist?

-> Antwort

Nach Denaturierung und Ausfällung, z.B. mit Trichloressigsäure, findet sich die Radioaktivität im Niederschlag. Damit ist gezeigt, dass die Acetylgruppe kovalent an das Chymotrypsin gebunden ist.

Der Nachweis, dass die Acetylgruppe sich an Ser 195 befindet, ist aufwendiger:

  • Proteolytische Zerlegung des markierten Chymotrypsins in Peptide
  • Isolierung des radioaktiven Peptids
  • Bestimmung von dessen Aminosäurensequenz und damit Identifizierung der markierten Aminosäure